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Precision for Medicine
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ÉTUDE DE CAS

Optimisation des méthodes de récupération des CTC et analyse des biomarqueurs chez les patients atteints de carcinome hépatocellulaire

Application clinique : analyse pharmacodynamique d'un traitement composé chez des patients atteints de carcinome hépatocellulaire (CHC)

Mots clés : CTC , expression des protéines, pharmacodynamie, comparaison tête à tête, ApoStreamTM, CHC

Contexte : Le carcinome hépatocellulaire (CHC) est un type de cancer rare aux États-Unis ; un grand nombre de cas de CHC sont dus à des métastases à distance provenant d'autres cancers, ce qui indique que les cellules tumorales circulantes jouent un rôle dans le développement de cette maladie. Cette étude examine les effets pharmacodynamiques d'une thérapie combinée - un inhibiteur d'HDAC couplé à un inhibiteur de la voie Raf - dans des CTC isolées en examinant les biomarqueurs qui régissent une voie apoptotique commune. Les biomarqueurs en question sont des participants directs à la voie examinée et une protéine inhibitrice qui peut arrêter la cascade de signalisation.

Méthodes : Des prélèvements de sang ont été effectués sur un maximum de dix patients atteints de CHC et les CTC ont été enrichies à l'aide du kit CellSearch® CTC et de l'appareil ApoStream™. Les CTC ont été dénombrées par cytométrie à balayage laser (LSC) en tant que cellules présentant un phénotype DAPI+/CK+/CD45-, les comptages des deux plateformes ont été comparés et l'ApoStream™ a été sélectionné pour être utilisé dans la suite de l'essai. Au cours de la deuxième phase, le sang de dix autres patients atteints de CHC a été prélevé et enrichi à l'aide de l'ApoStream™. Les cellules enrichies ont été colorées pour les marqueurs phénotypiques des CTC et les biomarqueurs d'intérêt pour l'essai, comme indiqué ci-dessus.

Résultats :

CTC_ennumeration_results

Figure 1 : Résultats du dénombrement des CTC chez dix patients pilotes. L'alpha-fœtoprotéine (AFP) a été utilisée à la fois comme méthode de dépistage et comme biomarqueur en aval pour une classification cellulaire plus poussée. Les résultats montrent qu'ApoStreamTM est un système capable d'isoler les cellules tumorales circulantes, en récupérant beaucoup plus de cellules que le kit CellSearch® CTC. ApoStreamTM isole également des CTC potentielles d'autres phénotypes (CK-/CD45-/AFP+ et CK+/CD45+/AFP+).

LSC_CTC_channel
Figure 2 : Images typiques du canal LSC pour les CTC. Les flèches rouges sur les images de dispersion représentent les CTC (CK+/CD45-/AFP+) ; les flèches turquoises représentent les PBMC. EpCAM a été examiné pour illustrer à la fois l'hétérogénéité de la tumeur et la capacité de l'ApoStreamTM à isoler les CTC EpCAM+ et EpCAM-.

Impact :
ApoCell a illustré les capacités de l'ApoStreamTM en tant que moyen d'isoler les cellules tumorales circulantes de patients atteints de CHC et a intégré son utilisation dans une étude clinique en cours.
en cours.

Références : Poklepovic, A. et al. "ApoStreamTm, an Antibody Independent Platform, Captures Circulating Tumor Cells in Patients with Hepatocellular Carcinoma". AACR, 2012.