Skip to content
Precision for Medicine
Contact

ÉTUDE DE CAS

Analyse des cibles thérapeutiques dans les CTC isolées chez des patients atteints de cancer du poumon non à petites cellules (NSCLC) à l'aide d'ApoStream®.

Application clinique : Identification des CTC positifs au récepteur alpha du folate (FRA) pour la stratification des patients

Mots clés : CTC , ApoStream®, stratification des patients, expression des protéines, NSCLC

Contexte : Cette étude a été lancée pour explorer l'utilité d'utiliser les niveaux d'expression des biomarqueurs dans les CTC comme moyen de sélection des patients à traiter dans le cadre d'un essai clinique. Le médicament examiné est un anticorps monoclonal qui se lie au récepteur alpha des folates (FRA), dont on estime qu'il est présent chez les trois quarts des patients atteints d'adénocarcinome du poumon, une forme de cancer du poumon non à petites cellules (CPNPC). ApoCell a été contactée pour développer un test utilisant son dispositif de capture de CTC indépendant des anticorps, ApoStream®, qui sera utilisé comme mécanisme de sélection pour l'inclusion dans un essai en cours avec ce médicament - les patients qui expriment fortement la cible du médicament représentent un groupe de test idéal.

Méthodes : Du sang a été prélevé sur 14 patients atteints de CPNPC et traité pour l'enrichissement des CTC par ApoStream®. Pour les 9 premiers patients, les CTC ont également été enrichies par le kit CellSearch® CTC, et les numérations cellulaires CK+/CD45-/DAPI+ des deux systèmes ont été comparées. Pour les cinq autres patients et les 15 donneurs sains, les CTC ont été enrichies par ApoStream® uniquement. Les cellules enrichies par ApoStream® ont été placées sur des lames de verre et colorées pour la cytokératine (CK), le CD45, le DAPI et le FRA. Les cellules colorées ont ensuite été analysées par cytométrie à balayage laser (LSC).
Les cellules colorées ont ensuite été analysées par cytométrie à balayage laser (LSC) pour déterminer le nombre total de CTC (cellules présentant un phénotype DAPI+/CK+/CD45-) positives pour FRA, le nombre total de cellules CD45+ exprimant FRA et l'intensité moyenne de fluorescence (MFI) du biomarqueur dans les CTC et les cellules CD45+.

Résultats :

Tête_à_tête

Figure 1 : Comparaison tête à tête. Comparaison tête à tête. L'enrichissement et l'identification par CellSearch® des CTC provenant de patients atteints de CPNPC étaient faibles (moyenne : 1,56, médiane : 0) ; ApoStream a enrichi un nombre significativement plus élevé de CTC (moyenne : 163, médiane : 81 ).
(moyenne : 163, médiane : 81).

FRA_analyse
Figure 2 : Analyse FRA. Analyse FRA : ApoStream® a enrichi les CTC des 5 autres patients atteints de NSCLC et n'a pas enrichi les CTC des 15 donneurs sains testés. On a constaté que FRA était exprimé sur un sous-ensemble de CTC (intervalle : 8,1 % - 32,8 %) de chaque patient, mais pas dans la population de leucocytes CD45+, ce qui indique que FRA pourrait servir de marqueur spécifique du cancer pour les thérapies ciblées.
Représentant_LSC_CTC
Figure 3. Images LSC représentatives des CTC: CTC enrichies par ApoStream® colorées avec les marqueurs de phénotype CTC et FRA. Les flèches jaunes dans chaque canal indiquent les CTC identifiées (cellules possédant un phénotype CK+CD45-DAPI+) qui expriment FRA.

Impact :: ApoCell a démontré la faisabilité d'utiliser l'expression du récepteur alpha du folate (ou l'expression d'autres cibles similaires) sur les CTC enrichies par ApoStream® pour informer les stratégies de sélection des patients dans un essai clinique.

Référence : Davis DW, et al. "La technologie ApoStream™ indépendante des anticorps isole les cellules tumorales circulantes positives au récepteur du folate alpha (FRA) ApoCell, Inc.
Positive Circulating Tumor Cells from Blood of Non-Small Cell Lung Adenocarcinoma Patients", résumé ePub, ASC0 2012.